病原微生物的動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn),是生物安全事故的重要風(fēng)險(xiǎn)防范點(diǎn)。感染的動(dòng)物攜帶的病原體在操作過程中可通過空氣氣溶膠、分泌物、排泄物等感染實(shí)驗(yàn)工作人員。
動(dòng)物感染的操作涉及動(dòng)物的麻醉、給藥、樣本采集、安樂死和剖檢,雞胚實(shí)驗(yàn)也可歸于感染動(dòng)物的操作,會(huì)產(chǎn)生各種意外事故。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)意外事故類型:
01)刺傷或切割傷 刺傷經(jīng)常發(fā)生在麻醉、給藥、采樣、雞胚接種等過程。切割傷經(jīng)常發(fā)生于手術(shù)、解剖等過程
02)抓咬傷 抓咬傷經(jīng)常發(fā)生于:墊料更換、麻醉、體溫測(cè)定等過程
03)動(dòng)物逃逸 常發(fā)生于麻醉、墊料更換等過程中。
04)麻醉過量 ?中大型動(dòng)物的麻醉過量視為意外事故。
05)雞胚實(shí)驗(yàn)意外 ?
· 接種雞胚時(shí)的刺傷
· 收集病毒時(shí)的溢灑
· 運(yùn)送雞胚時(shí)的跌落
· 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)意外事故應(yīng)急預(yù)案
針對(duì)可能出現(xiàn)的感染性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)意外事故,為保障生物安全實(shí)驗(yàn)室安全穩(wěn)定運(yùn)轉(zhuǎn),應(yīng)制定有效的意外事故處置預(yù)案。
發(fā)生意外事故處置時(shí)處置程序的原則是保護(hù)工作人員健康和安全,將對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和外部環(huán)境的污染降到最低。
采取措施的原則是控制擴(kuò)散,控制傳染源,安全處理污染物品和污染場(chǎng)所。
應(yīng)急預(yù)案應(yīng)包括(不限于):負(fù)責(zé)人、組織、應(yīng)急通訊、報(bào)告內(nèi)容、個(gè)體防護(hù)和應(yīng)對(duì)程序、應(yīng)急設(shè)備、撤離計(jì)劃和路線、污染源隔離與消毒滅菌、人員隔離和救治、現(xiàn)場(chǎng)隔離和控制、風(fēng)險(xiǎn)溝通等。
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)培訓(xùn)所有人員(包括來訪人員)熟悉應(yīng)急程序、撤離路線和撤離集合地點(diǎn);每年至少進(jìn)行一次演習(xí)。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)意外事故現(xiàn)場(chǎng)處理操作要點(diǎn)
在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)出現(xiàn)動(dòng)物意外事故時(shí),現(xiàn)場(chǎng)處置至關(guān)重要,細(xì)節(jié)上的處理會(huì)極大降低實(shí)驗(yàn)室污染和人員感染的風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí)配備必要的急救設(shè)備和器材,以備現(xiàn)場(chǎng)處理使用,急救箱的位置:應(yīng)置于防護(hù)區(qū)內(nèi),組成(包括但不限于):75%乙醇、碘伏、創(chuàng)可貼、紗布、繃帶、剪刀/鑷子、醫(yī)用膠布等。
01) 針刺傷/切割傷和抓咬傷的現(xiàn)場(chǎng)處理
① 立即終止實(shí)驗(yàn),將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放置于密封籠具中。
② 另一位實(shí)驗(yàn)人員向受傷人員受傷及全身噴灑75%乙醇,脫去手套(生物安全柜內(nèi))
③ 用手?jǐn)D壓局部使血液流出,用清水或洗眼器內(nèi)的水沖洗傷口。
④ 取出急救箱,對(duì)污染的皮膚和傷口用碘伏或者適當(dāng)消毒劑多次擦拭。
⑤ 對(duì)傷口進(jìn)行適當(dāng)包扎,戴干凈手套后按規(guī)定路線撤離退出實(shí)驗(yàn)室
⑥ 事故報(bào)告
⑦ 醫(yī)學(xué)評(píng)價(jià)/定點(diǎn)醫(yī)院救治/隔離等
該類事故現(xiàn)場(chǎng)處理的重點(diǎn):
① 控制動(dòng)物
② 清理傷口
02)動(dòng)物逃逸的現(xiàn)場(chǎng)處理
① 立即停止實(shí)驗(yàn),進(jìn)行捕殺,原則上人員在未抓獲逃逸動(dòng)物前不得離開動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。
② 如小型嚙齒動(dòng)物逃逸到實(shí)驗(yàn)室,則立即用長(zhǎng)柄鑷子,快速、穩(wěn)準(zhǔn)夾住動(dòng)物尾根部抓取動(dòng)物并放入籠盒中。如果動(dòng)物逃逸迅速、用鑷子不易抓取時(shí),則用專用網(wǎng)兜進(jìn)行抓取。如果動(dòng)物逃逸到設(shè)備下面不易抓取的地方,使用網(wǎng)兜手柄(網(wǎng)兜可拆分為手柄和網(wǎng)兜)小心將動(dòng)物趕出設(shè)備再行抓取。
③ 增加室內(nèi)換氣次數(shù),對(duì)動(dòng)物逃逸路線及動(dòng)物噴濺出的血液、分泌物用濕的消毒布或紙巾覆蓋消毒30分鐘后,置于規(guī)定的容器內(nèi)待高壓滅菌;并報(bào)告值管人員組織二次洗消。
該類事故現(xiàn)場(chǎng)處理的重點(diǎn):
① 嚙齒類動(dòng)物逃逸較常發(fā)生,抓捕應(yīng)局限于實(shí)驗(yàn)室內(nèi),切忌慌亂、多次夾取。盡量減少對(duì)動(dòng)物的刺激。
② 原則上逃逸動(dòng)物未撲殺之前不得退出實(shí)驗(yàn)室,避免動(dòng)物逃逸出實(shí)驗(yàn)室進(jìn)入公共區(qū)域,造成更大的公共衛(wèi)生事件。
03)麻醉過量的現(xiàn)場(chǎng)處理
麻醉過量的表現(xiàn)
輕度:指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物呼吸頻率明顯減慢有輕度的缺氧表現(xiàn),如舌頭由鮮紅變暗,但仍然是有規(guī)律的自主呼吸。呼吸深度正常,循環(huán)系統(tǒng)無明顯障礙。血壓、心跳正常。
重度:呼吸頻率大幅度下降且不規(guī)律,時(shí)有時(shí)無,忽深忽淺,明顯的缺氧表現(xiàn),如舌頭發(fā)紫,測(cè)血中的氧分壓和氧飽和度均明顯下降,循環(huán)系統(tǒng)受影響,如心跳減慢,血壓下降。但是,角膜反射存在。
危重:呼吸停止,心跳減慢,且不規(guī)律,血壓下降,或心跳驟停。
處理方法
① 呼吸極慢、不規(guī)則,但心跳正常時(shí):給予人工呼吸-壓胸法,適當(dāng)給予蘇醒劑。
② 呼吸停止仍有心跳時(shí):①實(shí)施人工呼吸,必要時(shí)可使用人工呼吸機(jī)或吸氧(吸入氣中O2占95%,CO2占5%);②注射50%葡萄糖液;③給腎上腺素及蘇醒劑。用5%碳酸氫鈉靜脈點(diǎn)滴,糾正酸中毒。
③ 呼吸、心跳均停止時(shí):用強(qiáng)心劑l:10000腎上腺素溶液心內(nèi)注射。注射呼吸興奮劑25%尼克剎米,靜脈注射或心內(nèi)注射。注射20mg/mL多巴胺提高血壓。用5%碳酸氫鈉靜脈點(diǎn)滴,糾正酸中毒。
該類事故現(xiàn)場(chǎng)處理的重點(diǎn):
① 中大型動(dòng)物易發(fā)生麻醉過量。
② 麻醉過量急救時(shí)防止抓咬傷。
04)雞胚實(shí)驗(yàn)意外事故處理
接種雞胚時(shí)的刺傷-處理同1“刺傷處理”
收集病毒時(shí)的溢灑-處理同“感染性物質(zhì)溢撒”
運(yùn)送雞胚時(shí)跌落的處理:
① 用吸水紙覆蓋住跌落區(qū)域,由外向內(nèi)傾倒含1%有效氯消毒劑,將蛋殼及蛋黃等固體包住后用鑷子收集置于規(guī)定的容器內(nèi)待高壓滅菌;并報(bào)告值管人員組織二次洗消。
② 跌落區(qū)域1米半徑以內(nèi)用消毒液傾倒,作用30分鐘。
③ 實(shí)驗(yàn)人員全身噴灑消毒液后按規(guī)定線路退出
④ 報(bào)告值班人員對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行二次洗消。
該類事故現(xiàn)場(chǎng)處理的重點(diǎn):
① 蛋黃歸屬于固體物質(zhì),需收集后高壓
② 尿囊液較粘稠,消毒的時(shí)間要比一般液體長(zhǎng)。
③ 消毒劑選擇取決于所操作病原,含氯消毒劑為通用消毒劑。
防患于未然-動(dòng)物實(shí)驗(yàn)意外事故的預(yù)防
01)針刺、切割傷、抓咬傷
① 戴防護(hù)手套:防咬傷手套/防割傷手套
② 使用合適的固定器
③ 動(dòng)物麻醉充分后操作。
02)動(dòng)物逃逸
① 動(dòng)物麻醉充分后操作
② 參加動(dòng)物保定技術(shù)培訓(xùn)
③ 生物安全柜內(nèi)操作
④ 籠具確定蓋好后放回籠具架;靈長(zhǎng)類動(dòng)物需要配合適的籠鎖。
03)麻醉過量
① 使用麻醉劑
② 少量分次給藥
a)動(dòng)物在麻醉期體溫容易下降,要采取保溫措施。
b)靜脈注射必須緩慢,同時(shí)觀察肌肉緊張、角膜反射和對(duì)皮膚夾捏的反應(yīng),當(dāng)這些活動(dòng)明顯減弱或消失時(shí),應(yīng)立即停止注射。做慢性實(shí)驗(yàn)時(shí),在寒冷冬季,麻醉劑在注射前應(yīng)加熱至動(dòng)物體溫水平。
③ 配備麻醉急救藥:強(qiáng)心劑,呼吸中樞興奮劑,碳酸氫鈉(用于糾正酸中毒),高滲葡萄糖(用于升血壓)等。
04)雞胚實(shí)驗(yàn)
雞胚轉(zhuǎn)運(yùn)使用運(yùn)輸容器。接種了微生物的雞胚在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)應(yīng)使用雙層硬質(zhì)不破耐高壓包裝,以防跌落時(shí)噴濺溢撒,將病原微生物局限在包裝容器內(nèi),便于后續(xù)消毒滅菌。
動(dòng)物生物實(shí)驗(yàn)室安全管理平臺(tái)為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室安全管理提供技術(shù)協(xié)助,平臺(tái)功能包含:比對(duì)項(xiàng)目設(shè)置、比對(duì)方法、檢測(cè)試劑和標(biāo)準(zhǔn)、比對(duì)樣品、樣品分析傳輸、結(jié)果判定標(biāo)等,質(zhì)量管控、實(shí)驗(yàn)安全等,進(jìn)一步提升實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化管理水平及檢測(cè)人員檢測(cè)技能水平,確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠,完善實(shí)驗(yàn)動(dòng)物信息化建設(shè),建立規(guī)范化安全管理平臺(tái),提升實(shí)驗(yàn)動(dòng)物公共服務(wù)平臺(tái)水平,提高科研創(chuàng)新能力,動(dòng)物生物實(shí)驗(yàn)室安全管理平臺(tái)促進(jìn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基礎(chǔ)性研究和科研水平的發(fā)展躍進(jìn)。